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尺寸排阻色譜柱的清洗流程
點擊次數(shù):3129 更新時間:2018-03-22

    尺寸排阻色譜柱包括分子量測定范圍不同的5種規(guī)格的色譜柱,可以將適合樣品分子量和分子量分布的不同級別的色譜柱串聯(lián)起來進(jìn)行分析。尺寸排阻色譜柱通過優(yōu)化填料的粒徑和細(xì)孔容積,實現(xiàn)了色譜柱性能的提升,和色譜柱操作壓強(qiáng)的降低。特別是對單克隆抗體三聚體/二聚體/單體的分離性能有很大的提高,對單體/片段也有很好的分離效果。

  尺寸排阻色譜柱為了方便根據(jù)待測成分的分子量來選擇合適的色譜柱,按照凝膠表面孔的大小分成了很多種類。各種色譜柱的排阻界限分子量在產(chǎn)品目錄上都有詳細(xì)記錄,使用的時候要按照待測樣品zui大分子量不超過尺寸排阻色譜柱的排除界限分子量的規(guī)則來進(jìn)行選擇。另外,在不超過排除界限分子量的前提下,盡量選擇排除界限分子量小的色譜柱比較合適。

  尺寸排阻色譜柱一般清洗流程如下:

  1. 將色譜柱與檢測器斷開;

  2. 將色譜柱反接后進(jìn)行沖洗;

  3. 在低于50%zui大推薦流速的條件下沖洗色譜柱。注意柱壓的變化。如果柱壓超出正常水平許多,可降低流速或更換低粘度的緩沖液作為沖洗溶劑;

  4. 一般用清洗溶液沖洗10-15倍柱體積即可。更換溶液時請用3-5倍柱體積的經(jīng)蒸餾的去離子水將尺寸排阻色譜柱沖洗干凈。

  尺寸排阻色譜柱為外來體分離和純化:

  尺寸排阻色譜柱包含具有約75納米的孔隙尺寸的樹脂。蛋白質(zhì)和其他污染分子比外來體小進(jìn)入的樹脂的孔,并在通過該柱的通道被延遲,在以后的級分洗脫。當(dāng)與TRPS測量結(jié)合使用QEV列導(dǎo)致更高質(zhì)量的外來體的測量和分析。

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