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離子色譜 (IonChromatography)是液相色譜(HPLC)的一種,是分析陰離子和陽離子的一種液相色譜方法。
離子色譜的基本原理
離子色譜的分離機(jī)理主要是離子交換,有3種分離方式,它們是離子交換色譜(HPIC)、離子排斥色譜(HPIEC)和離子對色譜(MPIC)。用于3種分離方式的柱填料的樹脂骨架基本都是苯乙烯-二乙烯基苯的共聚物,但樹脂的離子交換功能基和容量各不相同。HPIC用低容量的離子交換樹脂,HPIEC用高容量的樹脂,MPIC用不含離子交換基團(tuán)的多孔樹脂。3種分離方式各基于不同分離機(jī)理。HPIC的分離機(jī)理主要是離子交換,HPIEC要為離子排斥,而MPIC則是主要基于吸附和離子對的形成。
1、離子交換色譜
應(yīng)用離子交換的原理,采用低交換容量的離子交換樹脂來分離離子,這在離子色譜中應(yīng)用廣泛,其主要填料類型為有機(jī)離子交換樹脂,以苯乙烯二乙烯苯共聚體為骨架,在苯環(huán)上引入磺酸基,形成強(qiáng)酸型陽離子交換樹脂,引入叔胺基而成季胺型強(qiáng)堿性陰離子交換樹脂,此交換樹脂具有大孔或薄殼型或多孔表面層型的物理結(jié)構(gòu),以便于快速達(dá)到交換平衡,離子交換樹脂耐酸堿可在任何pH范圍內(nèi)使用,易再生處理、使用壽命長,缺點(diǎn)是機(jī)械強(qiáng)度差、易溶脹易、受有機(jī)物污染。 硅質(zhì)鍵合離子交換劑以硅膠為載體,將有離子交換基的有機(jī)硅烷與基表面的硅醇基反應(yīng),形成化學(xué)鍵合型離子交換劑,其特點(diǎn)是柱效高、交換平衡快、機(jī)械強(qiáng)度高,缺點(diǎn)是不耐酸堿、只宜在pH28范圍內(nèi)使用?! ‰x子交換色譜是常用的離子色譜。
2、離子排斥色譜
它主要根據(jù)Donnon膜排斥效應(yīng),電離組分受排斥不被保留,而弱酸則有一定保留的原理,制成離子排斥色譜主要用于分離有機(jī)酸以及無機(jī)含氧酸根,如硼酸根碳酸根和硫酸根有機(jī)酸等。它主要采用高交換容量的磺化H型陽離子交換樹脂為填料以稀鹽酸為淋洗液。
3、離子對色譜
離子對色譜的固定相為疏水型的中性填料,可用苯乙烯二乙烯苯樹脂或十八烷基硅膠(ODS),也有用C8硅膠或CN,固定相流動(dòng)相由含有所謂對離子試劑和含適量有機(jī)溶劑的水溶液組成,對離子是指其電荷與待測離子相反,并能與之生成疏水性離子,對化合物的表面活性劑離子,用于陰離子分離的對離子是烷基胺類等,用于陽離子分離的對離子是烷基磺酸類,如己烷磺酸鈉,庚烷磺酸鈉等對離子的非極性端親脂極性端親水,其CH2鍵越長則離子對化合物在固定相的保留越強(qiáng),在極性流動(dòng)相中,往往加入一些有機(jī)溶劑,以加快淋洗速度,此法主要用于疏水性陰離子以及金屬絡(luò)合物的分離,至于其分離機(jī)理則有3種不同的假說,反相離子對分配離子交換以及離子相互作用。
離子色譜系統(tǒng)
IC系統(tǒng)的構(gòu)成與HPLC相同,儀器由流動(dòng)相傳送部分、分離柱、檢測器和數(shù)據(jù)處理4個(gè)部分組成,在需要抑制背景電導(dǎo)的情況下通常還配有MSM或類似抑制器。其主要不同之處是IC的流動(dòng)相要求耐酸堿腐蝕以及在可與水互溶的有機(jī)溶劑(如乙腈、甲醇和丙酮等)中不溶脹的系統(tǒng)。因此,凡是流動(dòng)相通過的管道、閥門、泵、柱子及接頭等均不宜用不銹鋼材料,而是用耐酸堿腐蝕的PEEK材料的全塑IC系統(tǒng)。離子色譜的重要的部件是分離柱。柱管材料應(yīng)是惰性的,一般均在室溫下使用。柱和特殊性能分離柱的研制成功,是離子色譜迅速發(fā)展的關(guān)鍵。